Синдром коровьего бешенства или губчатая энцефалопатия крупного рогатого скота

удается обнаружить. Для этого используют стандартные иммуногистохимические

методы с PrP антителами. В обнаруженных полимерах протеина, после окраски

конго-рот, при поляризационной микроскопии выявляется зеленое двойное

лучепреломление.

Спинной мозг визуально практически сохранен. Лишь иногда отмечают

значительное уменьшение числа мотонейронов. Ни в одном из наблюдений не

было выявлено демиелинизации белого вещества спинного мозга. Несмотря на

относительно высокую концентрацию прионов, наблюдаемую в периферических

нервах, выраженных структурных изменений в них нет.

Клиника всех форм прионовой энцефалопатии может быть представлена

разнообразной неврологической симптоматикой, обусловленной вакуолизацией и

гибелью нейронов (основной механизм действия прионов на клеточном уровне)

практически в любом отделе серого вещества мозга, включая мозжечок.

Типичными являются:

. расстройства чувствительной сферы: амнезия различной степени, потеря и

извращение чувствительности, выпадение функций органов чувств

. нарушения в двигательной сфере: атаксия, обездвижение, атрофия мышц, в

том числе дыхательных, параличи

. нарушения психики: утрата профессиональных навыков, депрессия,

сонливость, агрессивность, снижение интеллекта, вплоть до полного

слабоумия

При развитии клинических проявлений нет ни признаков воспаления, ни

биологических аномалий в крови или в энцефало-арахноидальной жидкости, ни

тестов неинвазивных, ни прямых, ни косвенных, позволяющих уверенно

поставить диагноз. Электроэнцефалограмма сомнительна. Клинический диагноз

подтверждается только при гистологическом изучении центральной нервной

системы: спонгиоз с вакуолизацией нейронов, пролиферация астроцитов и глии

без признаков воспаления и демиелинизации.

в) Губкообразная энцефалопатия КРС

Поздним ноябрьским вечером 1986г. в особняке министра сельского

хозяйства, продовольствия и рыболовства Великобритании раздался тревожный

телефонный звонок:

"Извините, сэр! Говорит руководитель центральной ветеринарной

лаборатории. Я обязан сообщить вам, что мы обнаружили на территории

Великобритании новое, неизвестное ранее смертельное заболевание коров".

Так началась одна из наиболее трагических страниц в истории

инфекционной патологии среди животных. Благодаря средствам массовой

информации о неизвестной доселе болезни коров узнала широкая публика.

Речь идет о так называемой "болезни бешеной коровы" (не имеющей, по

существу, никакого отношения к бешенству), которая сыграла выдающуюся роль

в развитии исследований прионов и вызываемых ими заболеваний человека и

животных.

А начиналось все так. Во всех странах мира существуют фабрики и заводы

по производству мясокостной муки - продукта, получаемого путем измельчения

и особой обработки мясокостных отходов с боен. В начале технологической

цепочки расположен огромный (величиной с небольшую комнату) приемник,

напоминающий по форме растор мясорубки, где кости и другие не идущие в пищу

человека части туш и скелетов коров и овец подвергаются тщательному

размалыванию и измельчению с последующей разнообразной, в том числе жесткой

термической обработкой. В конце этой технологической цепочки стоит бумажный

мешок, куда сыплется коричневатый порошок - мясокостная мука. Ее

используют, например, владельцы собак, добавляя в корм щенкам для улучшения

питательных свойств пищи.

Действительно, такая добавка повышает ее белковую ценность и, кроме

того, способствует хорошему развитию костной системы собаки. Мясокостную

муку использовали также фермеры в качестве пищевой добавки при выращивании

молодняка крупного рогатого скота.

В конце 70-х годов в Великобритании предприниматели решили повысить

питательную ценность мясокостной муки и вместо жесткой температурной

обработки в технологический процесс ввели обработку растворителями. Прошло

несколько лет (инкубационный период). Тот роковой телефонный звонок,

который раздался в ноябре 1986-го, по сути дела провозгласил начало

ужасающей эпизоотии крупного рогатого скота по всей Великобритании.

Эпизоотия развивалась с нарастающей силой. Случаи заболеваний коров

были зарегистрированы во всех графствах страны, их число постоянно

увеличивалось и в 1992 году достигло пика: каждую неделю регистрировалось

по 1000 случаев заболеваний. Правительство Соединенного Королевства

предприняло энергичные меры, потребовавшие целого ряда законодательных

нововведений, организационных мер и, наконец, колоссальных затрат (лишь к

концу 1990г. было израсходовано более 500 миллионов фунтов стерлингов).

Эпизоотию удалось победить, однако за время её развития возникли новые

прионные болезни. Сегодня в упомянутый выше список добавились еще три:

губкообразная энцефалопатия крупного рогатого скота, губкообразная

энцефалопатия кошек и губкообразная энцефалопатия экзотических копытных.

Первая из них за 10 лет охватила и привела к гибели почти 200 тысяч голов

скота. Заболевание вначале бездомных, а позднее и домашних кошек

обусловлено употреблением ими в пищу мяса больных и погибших коров и быков.

Весьма поучительной оказалась и история заболевания экзотических копытных.

Различные виды антилоп и большой куду содержались в зоопарках и, также как

коровы и быки на фермах, получали при выкармливании в качестве пищевой

добавки ту самую злополучную мясокостную муку.

В то же самое время в Лондонском зоопарке были зарегистрированы случаи

прионных заболеваний у пантер, оцелотов, пум и даже у тигра. Всех их в

течение длительного времени кормили расколотыми головами и мясом крупного

рогатого скота.

Однако самыми трагическими последствиями той эпизоотии оказались

случаи (их было около 30) заболеваний молодых людей болезнью Крейтцфельдта-

Якоба. Известно, что подобная прионная болезнь поражает людей в возрасте за

60 лет, поэтому эти 30 случаев сразу же вызвали большую настороженность.

Увы! Вскоре было неопровержимо доказано, что штамм прионов, выделяемый из

тканей погибших молодых людей, был идентичен штамму, выделяемому именно от

заболевших и погибших коров, и отличался от штамма, выделяемого от пожилых

людей, погибших от болезни Крейтцфельдта-Якоба.

г) Диагностика губкообразной энцефалопатии

Один из "подводных камней" губчатой энцефалопатии состоит в том, что

до настоящего времени не разработан метод диагностики этого заболевания на

живых животных. Единственный способ постановки окончательного диагноза -

патогистологическое исследование мозга мертвого животного.

Рассмотрим существующие виды диагностики губчатой энцефалопатии:

клиническую, дифференциальную и лабораторную, а после этого обратимся к

официальному документу Министерства сельского хозяйства и продовольствия РФ

- "Методическим Указаниям по патогистологической диагностике прионных

инфекций животных".

Клиническая диагностика.

В клиническом плане симптомы проявляются после длительного

инкубационного периода (от 2 до 5 лет). Преобладают явления нервных

расстройств, связанные с повышенной чувствительностью и подвижностью

(повышенная возбудимость, расстройство координации движений конечностями),

что в конечном итоге приводит к смерти. У животного происходят изменения в

поведении: оно отказывается заходить в зал для осмотра, лягается, отстает

от стада, роет землю, подолгу мычит, нарушается координация движений,

особенно при движении назад, часто также отмечается скрежет зубами, иногда

животные принимают характерную позу задних конечностей, пятятся назад,

поднимают хвост, отмечается гиперметрия: шатающаяся неуверенная

спотыкающаяся походка, животное падает и с трудом поднимается. В числе

общих изменений следует отметить похудание, снижение продуктивности,

проблемы с приемом корма при не снижающемся аппетите. Иногда наблюдаются и

другие отклонения в поведении животных: дрожание, движения ушами, зуд и

чесание головы задними конечностями. К сожалению, зуд до сих пор хорошо не

изучен. Иногда он приводит к выпадению шерсти или похудению. "Рефлекс

голодания" отмечается при движении губ и расширении шей, а также отмечается

при ощупывании пояснично-крестцового отдела. При усилении (обострении)

двигательных и нервных расстройств попытки животного подняться после

падения остаются безуспешными и животное остается лежать. Принципиально

важно, что те или иные симптомы могут проявляться неожиданно, особенно в

стрессовых ситуациях. Длительность болезни варьируется. После проявления

первых симптомов до смерти животного проходит от 7 дней до нескольких

месяцев, но в основном 6-8 недель.

Дифференциальная диагностика.

Этот вопрос более детально будет рассмотрен несколько ниже, при

рассмотрении "Методических Указаний по патогистологической диагностике

прионных инфекций животных". Сейчас только отмечу, что губчатая

энцефалопатия дифференцируется от:

. метаболических болезней (гипокальцемия, гипомагнезимия или пастбищная

титания, ацидозный гастрит)

. отравлений химическими веществами (свинец, мышьяк, ртуть,

фосфорорганические соединения, карбоматы)

. бактериальных интоксикаций (энтеротоксимия, столбняк, ботулизм)

. вирусных и бактериальных инфекций (бешенство, болезнь Ауески, листериоз,

злокачественная катаральная горячка)

Лабораторная диагностика.

Макроскопические изменения при губчатой энцефалопатии не являются

основанием для подтверждения диагноза, они малоспецифичны и в основном с

лежачим положением туловища (струпья, пролежни) и истощением. Таким

образом, диагноз может быть подтвержден только лабораторными

исследованиями:

. гистологическим исследованием мозга

. иммуноцитохимическим исследованием с применением антисыворотки PrP

. электрономикроскопическими исследованиями на скрепи-ассоциированные

фибриллы (САФ)

Гистопатологическое исследование обнаруживает вакуолизацию цитоплазмы

отдельных нейронов и/или скопление нейронов. Вакуолизация, двусторонняя и

симметричная, встречаются в сером веществе церебрального ствола на уровне

жировой ткани, в Варолиевом мосту и в среднем мозге. Чтобы судить о

симметрии повреждений, голова не должна отделяться, т.е. необходимо

применение метода извлечения мозга целиком. Появление вакуолей в скоплении

нейронов может быть замаскировано под автолиз, что имеет большое значение

для быстроты исследования после эвтаназии. Время проведения исследования -

приблизительно 3 недели.

Для иммуноцитохимического исследования берутся те же ткани, что и для

гистопатологического исследования, окрашиваемые с помощью антисыворотки

PrP.

Диагностическое гистопатологическое исследование дополняется

электронной микроскопией. Это быстрый (ответ получают через 96 часов) и

достаточно достоверный и специфичный метод.

Теперь, как было упомянуто выше, обратимся к "Методическим Указаниям

по патогистологической диагностике прионных инфекций животных"

(Министерство сельского хозяйства и продовольствия РФ, Департамент

ветеринарии от 06.05.97г. № 13-7-2/939).

(...)

1. Общие положения

1.1. Прионные инфекции - медленно прогрессирующие болезни (...)

крупного рогатого скота (губкообразная энцефалопатия), (...) протекающие с

симптомами поражения центральной нервной системы и развитием в головном

мозге изменений, характерных для губкообразной энцефалопатии. Возбудитель

болезни - инфекционный белок "прион" - специфический сиалогликопротеин,

образующий в головном мозге бляшки скрепи-ассоциированных фибрилл,

отличается чрезвычайно высокой устойчивостью к действию физических и

химических факторов.

1.2. Диагностика указанных инфекций основана на гистологическом

исследовании головного мозга животных, имевших при жизни симптомы поражения

центральней нервной системы и убитых в терминальной стадии болезни.

1.3. При подозрении на прионные инфекции в ветеринарную лабораторию

направляют головной мозг (...) крупного рогатого скота при первичной

постановке диагноза - целиком, из неблагополучных по губкообразной

энцефалопатии хозяйств - можно только стволовую часть (обязательно

ромбовидный и средний мозг) (...).

1.4. Головной мозг (...) крупного рогатого скота (...) сразу же после

извлечения из полости черепа непосредственно в хозяйстве или на

мясокомбинате фиксируют в 10%-ном солевом растворе формалина, который

готовят по следующей прописи: 8,5 г поваренной соли растворяют в 900 мл

дистиллированной воды, затем добавляют100 мл формалина, содержащего 40%

формальдегида. Объем солевого раствора формалина должен в 10 раз превышать

объем фиксируемого головного мозга. Фиксацию головного мозга проводят в

течение 14 суток со сменой фиксатора через неделю.

2. Патогистологическое исследование

2.1. Для гистологического исследования вырезают поперечные кусочки

толщиной 0,3 - 0,5 см из следующих отделов головного мозга: (...) на

губкообразную энцефалопатию крупного рогатого скота - из продолговатого

мозга (области задвижки и задних ножек мозжечка), среднего мозга (область

ростральных холмов) (...)

2.2. Вырезанные кусочки головного мозга дополнительно фиксируют в

течение суток в аналогичном солевом растворе формалина, уплотняют в

целлоидине или парафине, после чего готовят гистологические срезы, которые

окрашивают гематоксилин-эозином.

2.3. При заболевании животных прионными инфекциями в гистологических

препаратах головного мозга обнаруживают следующие патогистологические

изменения: (...) губкообразная энцефалопатия крупного рогатого скота -

вакуолизацию серого вещества, реже цитоплазмы нервных клеток, гипертрофию и

пролиферацию астроцитов (...).

2.4. Диагноз на прионные инфекции при наличии характерных клинико-

эпизоотологических данных ставят в случае обнаружения: (...) губкообразная

энцефалопатия крупного рогатого скота - вакуолизации серого вещества (в

отличие от скрепи имеет основное диагностическое значение) головного мозга

или цитоплазмы нейронов (...).

2.5. Прионные инфекции необходимо дифференцировать: (...)

губкообразную энцефалопатию крупного рогатого скота - от листериоза,

бешенства, болезни Ауески, инфекционного ринотрахеита (нервная форма),

злокачественной катаральной горячки, губкообразности белого вещества

головного мозга неизвестной этиологии, а также отравлений различными

веществами (...)

2.6. Срок исследования - не более 25 суток со дня начала фиксации

головного мозга животного.

(...)

Приложение к "Методическим указаниям по патогистологической

диагностике прионных инфекций животных" от 06 мая 1997 г. №13-7-2/939.

(...)

Губкообразная энцефалопатия крупного рогатого скота.

Клинико-эпизоотологические данные. Инкубационный период при

губкообразной энцефалопатии длительный (не менее 20 месяцев). Симптомы

болезни проявляются только у взрослых животных (от 20 месяцев до 11 лет).

Клинического проявления болезни у телят не отмечают, но они могут быть

инфицированы возбудителем губкообразной энцефалопатии. Для болезни

характерны симптомы поражения центральной нервной системы: испуг,

стремление к уединению, животное стоит с опущенной головой, часто упираясь

ею в стену, спина дугообразно изогнута, при движении, наоборот, позвоночник

вогнут; повышенная возбудимость, агрессивность, проявляющаяся боданием,

ляганием, иногда клиникой бешенства; неадекватная реакция на прикосновение,

шум (испуг, падение, мышечная дрожь, мигание, лягание); беспорядочное

движение головой, трутся или бьются ею о стену; атаксия тазовых и грудных

конечностей, проявляющаяся неуверенной походкой, падением, особенно при

беге и резких поворотах, бегом, похожим на бег рысака, животное после

падения поднимается с трудом; тремор, редко миоклонические судороги, могут

сокращаться отдельные группы волокон мышцы, мышечная дрожь нижней части

шеи, подгрудка, области плеча, реже других частей тела; обвислость или

неправильное положение ушей (направлены вперед или назад), может быть

поднята верхняя губа, ноздри расширены, чихание, фырканье, частое

облизывание носового зеркальца, скрежет зубами. Указанные симптомы могут

наблюдаться в разных сочетаниях и с различной степенью выраженности.

Повышение температуры тела не отмечают. Болезнь всегда прогрессирует и

заканчивается петельно. Длительность клинико-морфологической стадии болезни

от одного до пяти месяцев и больше. Могут быть отдельные случаи ремиссии.

Патологоанатомические изменения. На вскрытии видимые изменения

отсутствуют.

Патогистологические изменения. Ведущее место среди изменений в

головном мозге занимает вакуолизация серого вещества. Вакуолизация

цитоплазмы нейронов встречается реже, чем при скрепи овец. Имеют место и

другие виды дистрофий нервных клеток, но они самостоятельного значения в

диагностике болезни не имеют. Диагноз. Диагноз на губкообразную

энцефалопатию крупного рогатого скота ставят на основании результатов

гистологического исследования с обязательным учетом клинико-

эпизоотологических данных, характерных для этой болезни.

Дифференциальный диагноз. Губкообразную энцефалопатию необходимо

дифференцировать от листериоза, бешенства, болезни Ауески, нервной формы

Страницы: 1, 2, 3, 4, 5